菌落計數方法的具體操作步驟及注意事項
更新時(shí)間:2024-01-11 文章更新于2024-01-11 點(diǎn)擊次數:14556次
現今,對菌落的研究越來(lái)越多,研究菌落的方法也越來(lái)越多,下面我們來(lái)具體說(shuō)說(shuō)菌落計數方法。菌落計數方法是將待測樣品適當稀釋后,取一定量的稀釋液涂布到平板上,每個(gè)單細胞生長(cháng)繁殖而形成肉眼可見(jiàn)的菌落,即一個(gè)單菌落代表原樣品中的一個(gè)單細胞,即菌落形成單位(colony-forming units,CUF)。該方法是根據每個(gè)活的細菌能長(cháng)出一個(gè)菌落的原理設計的,菌液中的死亡細菌或無(wú)繁殖能力的細菌不包括在內。
菌落計數方法操作方法如下:
1、取一定量(如100μl)的菌懸液,進(jìn)行10×倍梯度系列稀釋?zhuān)?br />2、取一定量(如100μl)稀釋液均勻涂布于平板培養基,每個(gè)稀釋度至少涂3個(gè)平板;
3、根據待計數細菌的培養特性,將涂好的平板放置于適當的條件下進(jìn)行培養;
4、待平板上長(cháng)出菌落后,選取稀釋度合適的平板(通常菌落數為數十至數百個(gè)之間),數平板上的菌落數,根據稀釋度和涂平板的液體量,換算出原始菌液中的活菌數。通常單位是CUF/ml,即每ml原始菌液中有多少個(gè)活菌數。
菌落計數方法的注意事項:
1、一般選擇每個(gè)平板上長(cháng)有30-300個(gè)菌落的稀釋度計算每毫升的含菌量較為合適。
2、同一稀釋度的三個(gè)重復對照的菌落數不應相差很大,否則表示試驗不。
3、為了減少誤差,同一稀釋度重復對照平板建議不要少于3個(gè)。
4、計數稀釋度平板的菌落數與上下相鄰稀釋度平板的菌落數基本呈10倍量關(guān)系,否則表示稀釋度不準確。
以上就是菌落計數方法的操作步驟及注意事項,希望對大家有所幫助。
菌落計數方法操作方法如下:
1、取一定量(如100μl)的菌懸液,進(jìn)行10×倍梯度系列稀釋?zhuān)?br />2、取一定量(如100μl)稀釋液均勻涂布于平板培養基,每個(gè)稀釋度至少涂3個(gè)平板;
3、根據待計數細菌的培養特性,將涂好的平板放置于適當的條件下進(jìn)行培養;
4、待平板上長(cháng)出菌落后,選取稀釋度合適的平板(通常菌落數為數十至數百個(gè)之間),數平板上的菌落數,根據稀釋度和涂平板的液體量,換算出原始菌液中的活菌數。通常單位是CUF/ml,即每ml原始菌液中有多少個(gè)活菌數。
菌落計數方法的注意事項:
1、一般選擇每個(gè)平板上長(cháng)有30-300個(gè)菌落的稀釋度計算每毫升的含菌量較為合適。
2、同一稀釋度的三個(gè)重復對照的菌落數不應相差很大,否則表示試驗不。
3、為了減少誤差,同一稀釋度重復對照平板建議不要少于3個(gè)。
4、計數稀釋度平板的菌落數與上下相鄰稀釋度平板的菌落數基本呈10倍量關(guān)系,否則表示稀釋度不準確。
以上就是菌落計數方法的操作步驟及注意事項,希望對大家有所幫助。
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