進(jìn)行內酰胺酶檢測前需了解檢測對象
更新時(shí)間:2022-04-25 文章更新于2022-04-25 點(diǎn)擊次數:764次
內酰胺酶檢測主要是針對治療感染性疾病藥物的檢測,這類(lèi)藥物都具有抗菌活性部分--β-內酰胺環(huán),這種酶是耐藥細菌針對內酰胺類(lèi)抗生素分泌的的,可以與β-內酰胺環(huán)結合,使β-內酰胺環(huán)裂解而被破壞,失去抗菌活性。
內酰胺酶檢測主要就是檢測內酰胺酶是否具有活性,其常用的方法有頭孢菌素顯色、酸定量、碘測量方法,及頭孢菌素酶、β酰胺酶和P/C測定藥盒法。β內酰胺酶破壞β內酰胺抗生素的β內酰胺環(huán)有兩種作用機制。
一、大多數常見(jiàn)的β內酰胺酶有一個(gè)依賴(lài)絲氨酸發(fā)揮作用的機制,并且根據氨基酸序列組成分為三類(lèi)(A,C和D)。通常它們的活性位點(diǎn)具有一個(gè)狹窄的縱形溝狀結構,在溝的底部形成了一個(gè)空腔(氧陰離子袋),這種疏松的構造容易彎曲,便于結合底物。由于β內酰胺環(huán)上的羰基碳在結合β內酰胺酶活性部位的絲氨酸時(shí)發(fā)生了不可逆的反應,結果使其成為開(kāi)環(huán)物,進(jìn)而重建了β內酰胺酶。這類(lèi)酶對青霉素、頭孢菌素、單內酰環(huán)類(lèi)抗生素都有活性。
二、是一類(lèi)不大多見(jiàn)的β內酰胺酶,被稱(chēng)為金屬類(lèi)β內酰胺酶,或B類(lèi)β內酰胺酶。它們的特點(diǎn)是利用一個(gè)2價(jià)金屬離子,絕大多數為鋅離子,分別與組氨酸或半胱氨酸結合,或同時(shí)與二者結合,并與β內酰胺類(lèi)抗生素的羰基碳的酰胺鍵相互作用,使其不能發(fā)揮作用。這類(lèi)酶主要對青霉素、頭孢菌素、碳青酶烯類(lèi)抗生素發(fā)揮作用,但對單內酰環(huán)類(lèi)抗生素無(wú)效。