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　　抑菌圈主要與藥敏試驗有關(guān)，是利用待測藥物在瓊脂平板中擴散使其周?chē)募毦L(cháng)受到抑制而形成透明圈，即抑菌圈。通過(guò)抑菌圈大小可以判定待測藥物抑菌效價(jià)。那么怎樣才能出現明顯的抑菌圈呢，下面我們來(lái)具體說(shuō)說(shuō)。
 

　　產(chǎn)生抑菌圈的方法主要有紙片擴散法(K-B法)、牛津杯法和打孔法三種。以教學(xué)中比較常做實(shí)驗的K-B法為例，先了解一下哪些因素會(huì )影響試驗結果，再針對性地解決，使得到明顯的抑菌圈。
 

　　1.藥敏紙片：紙片選用直徑6.00~6.35mm，吸水量為20ul的專(zhuān)用藥敏紙片。紙片的選擇會(huì )影響藥物擴散和細菌生長(cháng)。含藥紙片一般密封貯存在2~8℃，不超過(guò)一周，所以使用前應當提前從冰箱取出平衡室溫至少10min后再打開(kāi)，避免因冷凝水影響藥效，影響結果。
 

　　2.菌液：配制菌液的前提是保證菌液的純度，以免混入其他菌；另外濃度的配制一般是選擇麥氏比濁法，調成0.5麥氏單位的標準菌液濃度。所以配制濃度時(shí)應當嚴格對照，濃度太高或太低對實(shí)驗有影響。
 

　　3.培養基：選擇水解酪蛋白培養基(M-H)，為兼性厭氧菌和需氧菌藥敏試驗標準培養基，一般4℃保存。
 

　　以上的材料準備，如果是學(xué)校的實(shí)驗課程，一般有的實(shí)驗老師會(huì )直接幫忙準備好。
 

　　4.細菌接種：用無(wú)菌棉拭子蘸取已校正濃度的菌液，在管壁擠掉多余菌液。涂布整個(gè)培養基表面，每次將平板旋轉60°，涂抹三次，較后沿周邊擦繞兩圈，以保證菌液涂抹均勻。這樣才能使使抑菌圈顯現明顯，試驗結果不會(huì )出現較大的偏差。
 

　　5.貼藥敏片：涂菌后放置15min使平板上的水分被瓊脂*吸收后，才能貼藥敏紙片。這個(gè)時(shí)間不能過(guò)長(cháng)，否則會(huì )使細菌產(chǎn)生耐藥。
 

　?、儋N藥敏紙片時(shí)，每取一種藥敏紙片必須燒一下鑷子口，避免藥敏紙片之間相互混淆，以提高藥敏的準確性。
 

　?、趦杉埰g距離不小于24mm，紙片距平板邊緣不小于15mm，以免得到的抑菌圈交叉或者不完整。
 

　?、奂埰N后不可再拿起，放下后輕壓使藥敏紙片貼合在平板上?？梢栽谶€未貼之前在培養基底部量好距離，確定好紙片放置位置。
 

　?、軐⑵桨宸D放置。
 

　　6.恒溫箱培養：35℃恒溫箱培養18~24小時(shí)。放置的時(shí)候記得放置平穩。
 

　　整個(gè)流程里面比較會(huì )影響實(shí)驗結果的就差不多這些了，任何實(shí)驗都存在不可控的誤差，只有操作得當，結果才能更好。
 

　　以上方法可以出現較明顯的抑菌圈，希望能幫助大家更好地進(jìn)行實(shí)驗。